he染色的操作流程⎛⎞石蜡切片he染色的操作流程

he染色的操作步骤：将石蜡切片置于烘箱中60℃烤1～2h；石蜡切片常规二甲苯，乙醇脱蜡至水，苏木素染10分钟，流水冲洗，去余色，0.7%盐酸乙醇分化数秒钟，流水冲洗，切片变蓝约15分钟，7.95%乙醇30秒钟。

大家好，今天美滋味百科小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于he染色的操作流程的问题，于是美滋味百科小编就整理了4个相关介绍he染色的操作流程的解答，让我们一起看看吧。

文章目录：

1. HE染色的操作步骤是什么?
2. HE染色的方法步骤及注意事项
3. he染色步骤
4. he染色的基本步骤

一、HE染色的操作步骤是什么?

he染色的操作步骤：

1. 将石蜡切片败李枯置于烘箱中60℃烤扰山1～2h；

2. 石蜡切片常规二甲苯，乙醇脱蜡至水，

3. 苏木素染10分钟，

4. 流水冲洗，去余色，

5. 0.7%盐酸乙醇分化数秒钟，

6. 流水冲洗，切片变蓝约15分钟，

7. 7.95%乙醇30秒钟，

8. 8.酒精性伊红染30秒，

9. I 95%乙醇30秒钟，

10. II 95%乙醇30秒钟，

11. I 100%乙醇30秒钟，

12. II100%乙醇30秒钟，

13. 石碳酸二甲苯30秒钟，（1： 4石碳酸1-二甲苯4）

14. I二甲苯30秒钟，

15. II二甲苯30秒钟，

16. 中性树胶封片。 

二、HE染色的方法步骤及注意事项

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  一 取材和固定

  取材后经固定24小时（4%PA灌注取材的后固定6~8小时）以后，流水冲洗24小时，置于70%~80%乙醇中，可长期保存。

  二 脱水和包埋

  1、95%ALC（二道） Ⅰ 2~4h

  Ⅱ 2h

  2、无水ALC（二道） Ⅰ 1.5h

  Ⅱ 1h

  3、二甲苯+无水乙醇（1：1） 20min

  4、二甲苯（二道） Ⅰ 10min

  （注：脱水透明esp.透明时间可适当延长） Ⅱ 10min

  5、浸软蜡（50~52℃）（二道） Ⅰ 30min

  Ⅱ 1h

  6、浸硬蜡（58~60℃）（二道） Ⅰ 30min

  Ⅱ 30min

  7、包埋：注意温度、切面。

  三 切片

  修、切、展、贴、烤（烤片55~60℃） 3~10h

  四 HE染色

  1、二甲苯脱蜡 五道，每道5~10分钟

  2、无水乙醇 Ⅰ 5min

  Ⅱ 5min

  3、95%乙醇 Ⅰ 5min

  Ⅱ 5mn

  4、80%乙醇 5min

  5、70%乙醇 5min

  6、D．W． 3~5min

  7、Harris苏木素液 5min（冬天可适当延长，eg.20min）

  8、水洗

  9、0.5%盐酸酒精分色 3~10seconds，镜下观察

  10、水洗蓝化 15~30min（注意换水）

  11、70%乙醇 5min

  12、80%乙醇 5min

  13、伊红液（95%乙醇溶液） 3~30seconds

  14、95%乙醇 Ⅰ 1min

  Ⅱ 5min

  15、无水乙醇 Ⅰ 5min

  Ⅱ 5min

  16、二甲苯+乙醇（1：1） 5min

  17、二甲苯 Ⅰ 5min

  Ⅱ 5min

  Ⅲ 5min

  18、中性树胶封片。

  HE染色注意事项：

  1. 染色时调节pH值很重要。如果组织块在福尔马林中固定时间长，组织酸化而影响细胞核着色。因此，要在自来水中冲洗时间长一些或在饱和碳酸锂水溶液中处理10-30min，这样可以使细胞核着色较深。染伊红时胞浆着色不佳，可在伊红溶液中滴加1-2滴冰醋酸。

  2. 切片染苏木精后，分色这一步是关键，应在显微镜下控制进行，一般以细胞核染色清楚（晰）而细胞质基本无色为佳。如果过分延长分色时间将导致染色太浅，应重新染色后再行分色。

  3. 切片经酒精脱水后，入二甲苯时可出现白色不透明状态，此为脱水不彻底，应将切片退回无水酒精，更换酒精、二甲苯，以求彻底脱水与透明。

  4. 在染色过程中不要让切片干燥，以免切片收缩、变形，影响神经元形态。

  5. 切片从二甲苯取出或进入二甲苯前，切片周边均应擦干净或吸干多余水分。

  6. 最后封固时，要用中性树脂，防止日后褪色，盖片要选大于组织块的面积，如漏出一部分不久将会褪色，所用树脂浓度要适当，树脂封固时不能有气泡。

  苏木精—伊红染色法简称HE染色法，它是最常用的普通染色方法。苏木精（hematoxylin）是阳离子染料，将细胞核内的嗜碱性物质染成蓝紫色。伊红（eosin）是阴离子染料，将细胞质和胶原纤维等染成粉红色。    

三、he染色步骤

HE染色是一种常用的组织病理学染色方法，用于观隐尺笑察组织切片中细胞核和细胞质的形态和结构。苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，简称HE染色法 ，石困清蜡切片技术里常用的染色法之一 。其步骤如下：

1. 取组织切片：将要观察的组织切片经过脱水、清洁、包埋等处理后，放置在载玻片上。

2. 焙烧：将载玻片放入烤箱中进行焙烧，使组织切片贴附在玻片上。

3. 脱蜡：将载玻片放入脱蜡剂中，使组织切片中的蜡质溶解。

4. 水洗：将载玻片放入水中洗涤，去除脱蜡剂。

5. 染色：将载玻片放入碱性染色液中，对细胞核进行灶含染色。然后将载玻片放入酸性染色液中，对细胞质进行染色。

6. 水洗：将载玻片放入水中洗涤，去除多余染色剂。

7. 脱水：将载玻片放入酒精中进行脱水处理。

8. 透明化：将载玻片放入透明剂中，使组织切片透明。

9. 封片：将载玻片放入封片剂中，用玻片覆盖组织切片，形成封片。

10. 镜检：将封片放入显微镜下进行观察和分析。

以上就是HE染色的步骤。

四、he染色的基本步骤

he染色的基本步骤如下：

1、石蜡切片脱蜡至水。依次将切片放入二甲苯Ⅰ10min-二甲苯Ⅱ10min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。

2、苏木素染细胞核。切片入Harris苏木素染3-8min，自来水洗，1%的盐酸酒精分化数秒，自来水冲洗，0.6%氨水返蓝，流水冲洗。

3、伊红染细胞质。切片入伊红染液中染色1-3min。

4、脱水封片。将切片依次放入95%酒精Ⅰ5min-95%酒精Ⅱ5min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min，二甲苯Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ，5min中脱水透明，将切片从二甲苯拿出来稍晾干，中性树胶封片。

5、显微镜镜检，图像采集分析。

实验结果

细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色，胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色，弹力纤维呈亮粉红色，红血球呈橘红色，蛋白性液体呈粉红色。

到此，以上就是美滋味百科小编对于he染色的操作流程的问题就介绍到这了，希望介绍关于he染色的操作流程的4点解答对大家有用。